PHD theses : Medical Laboratory Science

Permanent URI for this collectionhttps://repository.neelain.edu.sd/handle/123456789/496

Browse

Filter results by typing the first few letters
Now showing 1 - 1 of 1
  • Thumbnail Image
    Item
    Thesis submitted in fulfillment of the requirements of Ph.D. in Medical Parasitology (Molecular-Parasitology)
    (Al-Neelain University, 2011) Elamin Abdulkareem Elamin
    Abstract Introduction: In regions highly endemic for malaria, the prevalence of placental malaria ranges from 30% to 60% and has been associated with increased risk of adverse infant outcomes, particularly in primigravidae The study was conducted on mothers after delivery to detect hidden Plasmodium falciparum parasite, merozoite surface protein (msp1) & (msp 2) by PCR technique.75 pregnant women were enrolled in the study; the mean age of them was 26.30 ± 7.02. 5ml of venous blood were collected from the mothers after delivery. Materials and methods: Approximately, 5ml of venous and placental blood were obtained from 75 mothers after delivery, attended Omdurman Maternity Hospital, which is one of the largest maternity hospitals in the capital Khartoum. The mean age of the mothers was 26.3±7.02.The study was conducted during the period January to May 2009. Genomic DNA was extracted from peripheral and placental blood samples using modified phenol chloroform technique. The msp-1 allele (MAD20,) and msp-2 allele A1, A2, B1 and B2, P. falciparum primers were used for PCR. The PCR product was analyzed on 1.5% Agarose gel and visualized by gel documentation system after ethidium bromide staining. Results: The results revealed that the overall malaria detection rate in peripheral blood and placental blood using ICT was 10.7%. With the PCR (msp-1 alleles) the detection rate of malaria in peripheral blood was found to be 9.3%, while in placental blood the same technique showed a detection rate of 10.7%. For PCR (msp-2 alleles), the detection rate of malaria in peripheral blood was 12%, while in placental blood the same technique showed detection rate of 21.3% malaria. p The detection rate of the different combination of the positive and negative results in peripheral and placental blood by using msp-1 alleles revealed that the highest rate (84%) was reported among the peripheral negative & placental negative group while the lowest rate (4%) was reported among the peripheral positive and placental positive. The detection rate of the different combination of the positive and negative results in peripheral and placental blood by using msp-2 alleles revealed that the highest rate (72%) was reported among the peripheral negative & placental negative group while the lowest rate (5.3%) was reported among the peripheral positive and placental positive . When msp-1 and msp-2 alleles used in combined way for the detection of malaria parasite in peripheral and placental blood, they revealed that they were identical in 66.7% of examined samples, discordant in 10.7% of the samples, positive in peripheral blood and not in placental blood in 8% of the samples and positive in placental blood not in peripheral blood in 14.7% of the samples. Out of the 53 cases with no previous history of malaria when using the ICT, 14 were found negative for malaria and out of the 5 positive cases with previous history of malaria, 3 were found positive. For the msp-1 used in peripheral blood, out of 52 cases with no previous history of malaria, 16 were found positive for malaria and out of the 6 cases with previous history of malaria, 1 case was found positive for malaria. For the msp-1 used in placental blood, out of the 51 cases with no previous history of malaria, 16 were found positive for malaria and out of the 7 cases with previous history of malaria, 1 case was found positive for malaria. For the msp-2 used in peripheral blood, out of 51 cases with no previous history of malaria, 15 were found positive for malaria and out of the 7 cases with previous history of malaria, 2 cases were found positive for malaria. For the msp-2 used in placental blood, out of 46 cases of no previous history of malaria, 13 were found positive for malaria and out of the 11 cases with previous history of malaria, 4 cases were found positive for malaria. When using the msp-1 for peripheral blood, the result showed that the mean body weight among the negatives was 3.187 and it was 3.1833 among the positives. When using the msp-1 for placental blood the result showed that the mean body weight among the negatives was 3.1967 and it was 3.1000 among the positives. When using the msp-2 for peripheral blood the result showed that the mean body weight among the negatives was 3.1705 and it was 3.3286 among the positives. When using the msp-2 for placental blood the result showed that the mean body weight among the negative was 3.1786 and it was 3.1889 among the positives. Conclusion: In the vast majority of cases, some sequestered genotypes remain hidden, undetected in the peripheral circulation, indicating that analysis of peripheral parasites generates a partial picture of a P. falciparum infection. The cord blood must be collected from the umbilical cord to detected placental P. falciparum infection particularly in primigravidae الخلاصة مقدمة:- فى المناطق التى تنتشر فيها الملاريا بكثافة , تكون نسبة الاصابة للمشيمة حوالى 30% الى 60% وهذا يؤثر على الجنين بصورة مباشرة خاصة فى الحمل الاول . هذه الدراسة على السيدات بعد الولادة مباشرة لاكتشاف اقسومة البروتين السطحى لطفيل المنجلية المتصورة عن طريق تقنية تفاعل البلمرة السلسلى. المواد و الاساليب:- تم جمع حوالى 5 مل من دم الوريد و المشيمة من السيدات (75) موضوع الدراسة بعد الولادة مباشرة وذلك فى مستشفى امدرمان للولادة احد اكبر المستشفيات للولادة فى العاصمة الخرطوم خلال الفترة ما بين يناير و مايو من العام 2009.كان المتوسط العمرى للنساء 7.02 ± 26.3 . تم استخراج الحمض النووى من عينات الدم الطرفية و المشيمية بواسطة طريقة الفينول كلوروفورم المعدلة . كما تم استخدام البرايمرات الخاصة باقسومة البروتين السطحى لطفيل المنجليات المتصورة 1و2 ف تقنية تفاعل البلمرة السلسلى , المستخلص من هذه التقنية تمت معالجته بحوالى 1.5 من الجل ومن ثم القراءة بواسطة التصوير الهلامى بواسطة الاشعة بعد تلطيخه بالاسيديوم بروميد. النتائج:- اظهرت نتيجة الفحص للدم الطرفى و المشيمى عن طريق التفاعلات المناعية الكروموتقرافية ان نسبة الاصابة كانت حوالى %10.7. بينما كانت نسبة الاصابة عندما تم استخدام تقنية تفاعل البلمرة السلسلى الخاصة باقسومة البروتين السطحى لطفيل المنجليات المتصورة 1 هى %9.3 للعينات الطرفية. بينما كانت النتيجة فى عينات المشيمة هى%10.7 . بينما كانت نسبة الاصابة عندما تم استخدام تقنية تفاعل البلمرة السلسلى الخاصة باقسومة البروتين السطحى لطفيل المنجليات المتصورة 2 هى %12 للعينات الطرفية . بينما كانت النتيجة فى عينات المشيمة هى %21.3 . اظهرت النتائج نسب مختلفة للمجموعات من حيث سلبية وايجابية النتيجة عندما تم استخدام تقنية تفاعل البلمرة السلسلى الخاصة باقسومة البروتين السطحى لطفيل المنجليات المتصورة 1 حيث كانت اعلى نسبة عندما كانت النتيجة سلبية فى عينات الدم الطرفية و المشيمية وهى (%84). بينما كانت ادنى نتيجة عندما كانت النتيجة ايجابية فى الدم الطرفى و المشيمى وهى (%4). كما اظهرت النتائج نسب مختلفة للمجموعات من حيث سلبية وايجابية النتيجة عندما تم استخدام تقنية تفاعل البلمرة السلسلى الخاصة باقسومة البروتين السطحى لطفيل المنجليات المتصورة 2 حيث كانت اعلى نسبة عندما كانت النتيجة سلبية فى عينات الدم الطرفية و المشيمية وهى (%72). بينما كانت ادنى نتيجة عندما كانت النتيجة ايجابية فى الدم الطرفى و المشيمى وهى (%5.3) . عندما تم استعمال تقنية تفاعل البلمرة السلسلى الخاصة باقسومة البروتين السطحى لطفيل المنجليات المتصورة 1 و 2 للدم الطرفى و المشيمى كانت النسب , متماثلة فى %66.7 من العينات , مختلفة فى %10.7, كما كانت النسب ايجابية فى الدم الطرفى وسلبية فى المشيمى فى %8, وايجابى فى الدم المشيمى وسلبى فى الطرفى فى %14.7 . فى حوالى 53 من من ليس لهم اصابة سابقة بالملاريا وجد فقط 14 لهم نتيجة ايجابية ومن 5 كان لهم تاريخ اصابه بالمرض ظهر واحد فقط بنتيجة ايجابية. اما عندما تم استخدام تقنية تفاعل البلمرة السلسلى الخاصة باقسومة البروتين السطحى لطفيل المنجليات المتصورة 1 للدم الطرفى فمن حوالى 52 من من لم يكن لهم تأريخ بالاصابة بالمرض كان هناك حوالى 16 نتيجة ايجابية وكان فى حوالى 6 من من كان لهم سابق اصابة بالملاريا فقط واحد ايجابى لنتيجة. اما عندما تم استخدام تقنية تفاعل البلمرة السلسلى الخاصة باقسومة البروتين السطحى لطفيل المنجليات المتصورة 1 للدم المشيمى فمن حوالى 51 من من لم يكن لهم تأريخ بالاصابة بالمرض كان هناك حوالى 16 نتيجة ايجابية وكان فى حوالى 7 من من كان لهم سابق اصابة بالملاريا اظهرت النتيجة ان عينتين فقط ايجابيتين اما عندما تم استخدام تقنية تفاعل البلمرة السلسلى الخاصة باقسومة البروتين السطحى لطفيل المنجليات المتصورة 2 للدم الطرفى فمن حوالى 51 من من لم يكن لهم تأريخ بالاصابة بالمرض كان هناك حوالى 15 نتيجة ايجابية وكان فى حوالى 7 من من كان لهم سابق اصابة بالملاريا اظهرت النتيجة ان عينتين فقط ايجابيتين. اما عندما تم استخدام تقنية تفاعل البلمرة السلسلى الخاصة باقسومة البروتين السطحى لطفيل المنجليات المتصورة 1 للدم المشيمى فمن حوالى 46 من من لم يكن لهم تأريخ بالاصابة بالمرض كان هناك حوالى 13 نتيجة ايجابية وكان فى حوالى 11 من من كان لهم سابق اصابة بالملاريا اظهرت النتيجة ان 4 عينات ايجابية . عندما تم استخدام تقنية تفاعل البلمرة السلسلى الخاصة باقسومة البروتين السطحى لطفيل المنجليات المتصورة 1 للدم الطرفى لمن كانت نتائجهم سلبية كان متوسط وزن الجنين هو 3.187 اما من كانت نتائجهم ايجابية فكان المتوسط هو 3.1833 .اما عندما استخدام تقنية تفاعل البلمرة السلسلى الخاصة باقسومة البروتين السطحى لطفيل المنجليات المتصورة 1 للدم المشيمى لمن كانت نتائجهم سلبية كان متوسط وزن الجنين هو 3.1967 اما من كانت نتائجهم ايجابية فكان المتوسط هو 3.1000 . عندما تم استخدام تقنية تفاعل البلمرة السلسلى الخاصة باقسومة البروتين السطحى لطفيل المنجليات المتصورة 2 للدم الطرفى لمن كانت نتائجهم سلبية كان متوسط وزن الجنين هو 3.1705 اما من كانت نتائجهم ايجابية فكان المتوسط هو 3.3286 .اما عندما استخدام تقنية تفاعل البلمرة السلسلى الخاصة باقسومة البروتين السطحى لطفيل المنجليات المتصورة 2 للدم المشيمى لمن كانت نتائجهم سلبية كان متوسط وزن الجنين هو 3.1786 اما من كانت نتائجهم ايجابية فكان المتوسط هو 3.1889