Production of phytase by Pichia anomala isolated from yoghurt, grape and orange

Abstract

Abstract Phytases (myo-inositol hexakisphosphate phosphohydrolases; EC 3.1.3.8 and 3.1.3.26) break down phytate, the main storage form of phosphorus in plants. Phytase enzymes are used in a wide range of applications, including animal feed supplementation, soil amendment, the food industry, pharmaceuticals, and aquaculture. The main objective of the current study was to produce phytase by Pichia anomala isolated from yoghurt, grapes and orange and estimate the concentration of produced phytase. This work was conducted by isolation of Pichia anomala using Potato dextrose agar medium from yoghurt, grape and orange. Three yeast isolates were obtained from yoghurt, grape and orange, these isolates were identified as Pichia anomala using cultural, morphological and biochemical tests. The three isolates were subject to screening for phytase enzyme production on cane molasses media. The production of phytase was achieved by inoculation of isolates in flasks that contained cane molasses media. The concentration of phytase was estimated by flourmeteric technique at a wavelength of 820 nm after an incubation period of 10 days. All three isolates showed varied phytase production on this medium. Pichia anomala isolated from youghurt showed the highest phytase production (22.5 U/ml) while Pichia anomala isolated from grape produced the lowest phytase (2.5 U/ml). The third isolate from orange produced medium phytate amount (13.3U/ml). The highest production was shown after an incubation period of 10 days. This study concluded that all Pichia anomala isolates showed the ability to produce phytase which has a good potential for used for phytase production after optimization of the production.

مستخلص البحث

الفايتيز انزيم يكسر الفايتيت وهو المصدر الرئيسي لتخزين الفسفور في النبات الفايتيز يستخدم في مدي واسع من التطبيقات تتضمن غذاء للحيوانات وتعديل التربة والصناعات الغذائية والأدوية وتربيه الاحياء المائية. الهدف الاساسي من هذه الدراسة هو دراسة انتاج الفايتيز والاختلاف بين السلاسة المنتجة للفايتيز وغير المنتجة عن طريق عزل البيشيا انوملا من مصادر مختلفة (الزبادي والعنب والبرتقال) باستخدام وسط البطاطس المتصلب.تم الحصول على ثلاث عزلات من الخمائر من الزبادي، العنبوالبرتقال هذه العزلات عرُفت كبيشيا انوملا باستخدام الصفات الشكلية، والاختبارات الكيمائية. خضعت العزلات المعزولة لفحص انتاج انزيم الفايتيز في وسط المولاص.تم انتاج الفايتيز بزراعة العزلات في دوارق معملية تحتوي على وسط غذائي. تم تقدير تركيز الفايتيز المنتج بواسطة القياس الطيفي في طول موجي820نانوميتر. بعد تحضين مدته 10ايام أظهرت أظهرت كل العزلات المقدرة على انتاج انزيم الفايتيز في هذا الوسط الغذائي. البيشيا انوملا المعزولة من الزبادي سجلت اعلي تركيز انتاج الفايتيز 22.5) وحده/مل (بينما انتجت البيشيا انوملا المعزولة من العنب اقلتركيزللفايتيز 2.5) وحده/مل (وكان التركيز المتوسط من البيشيا انوملا المعزولة من البرتقال 13.3) وحده/مل). أفضل فتره تحضين هي 10ايام التي تشجع انتاج الفايتيز. أظهرت كل العزلات القدرة على انتاج كميات معتبرة من الفايتيز ويمكن ان تستخدم في انتاج الفايتيز بعد اجراء عمليات تقويم الانتاج.