Investigation of the Chemical Constituents and Antioxidant Activity of Aerial Parts of Haplophyllum tuberculatum

Abstract

ABSTRACT

This study was conducted to evaluate the antioxidant activity of different extracts of aerial parts of Haplophyllum tuberculatum and it includes extensive chemical study to identify the chemical composition of the active extract(s) by chromatographic and spectroscopic methods. Phytochemical screening of aerial parts of H. tuberculatum alcohol extract revealed presence of saturated and unsaturated sterols, triterpenoids, alkaloids and carbohydrates, 2-deoxy sugars, flavonoids, tannins, coumarins and saponins. In the quantitative analysis secondary metabolites, saponins(23.30%), flavonoids, (20.00%), terpenoids (13.33%), & alkaloids (9.45% are extracted by using the standard chemical protocol. The fine powder of the H. tuberculatum aerial parts was extracted with several solvents (pet- ether, chloroform, ethanol) using two methods (maceration and soxhlet).Thin layer chromatography of the petroleum ether (boiling point 60-80oC) extract demonstrated the occurance of furocoumarins compounds in the plant isolated by PTLC an afforded six pure fractions. The antioxidant activity of extracts was estimated and the results showed that ethanol(mac) extract show high DPPH free radical scavenging activity(82.36%) at 100 μg/ml as compared to that of ethanol (sox) (50%) at the same concentration. The active ethanolic ) mac (extract was further studied by intensive analytical investigations in order to isolate the extract components using Column chromatography TLC and preparative TLC chromatographic fractionation, an afforded fourteen pure fractions which were analyzed by spectroscopic methods (Infra-red and Ultra-violet). On the other hand the chemical composition of the volatile oil of Haplophyllum tuberculatum was investigated using GC-MS technique four compounds were completely identified and the major compounds was carvotanacetone ( 95.58%).

المستخلص الهدف من الدراسة تقييم مدي فعالية مستخلصات المجموع الخضرى لنبات الحزا ﻭﺩﺭﺍﺴـﺔ ﺍﻨﺸـﻁﺘﻬﺎ ﺍﻟﻤﻀـﺎﺩﺓ للاكسدة, أيضا شملت الدراسة التفصيلية لمستخلصات النبات باستخدام المسح الكيميائي و طرق التحليل الكروماتوغرافى والطيفى.تم إجراء المسح الكيميائى النباتى للمستخلص الكحولى والذى أسفر عن وجود الصابونينات، التانينات, الإستيرولات، ليوكوايثوسيانينات ،الفلافونيدات،الكاردوليندات, القلويدات، الكيومارينات و القلويدات .عليه تم استخلاص مركبات الايض الثانويه من المجموع الخضري للنبات وتقديرها كميا وذلك باستخدام الطرق القياسية المعروفة الصابونينات ,(23.30%)الفلافونيدات , (20.00%)التربينات ( (13.33%القلويدات (9.45%). كما تم استخلاص مسحوق باستخدام طريقة (النقع والأستخلاص المستمر), أظهر مستخلص إيثر البترول بواسطة كروماتوغرافيا العمود وكروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة(TLC) ظهور مركبات فيوران كومارين التى تم فصلها الي ستة مجزئات نقية بواسطة كروماتوغرافيا التحضيرية (PTLC) ومن ثم أجريت التجارب المعملية الحيوية لكل المستخلصات لاختبار فعاليتهما كمضادات للاكسدة ، أوضحت النتائج أن المستخلصات لها فعالية ولكن أكثرها فعالية هو مستخلص الايثانول (نقع ) الذي أعطي أعلي تأثير) 82.36%( عند تركيز100 μg/ml بينما مستخلص الايثانول (بالسوكسليت) سجل فعالية متوسطه (50%) عند نفس التركيز عليه تمِ إختيار مستخلص الايثانول بالنقع لإجراء الطرق التحليلية مثل عملية التجزئه بواسطة كروماتوغرافيا العمود وكروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة والتحضيرية التى نتج عنها فصل أربعة عشر مجزئآ نقيآ تم تحليلها بإستخدام طيف الأشعة تحت الحمراء والأشعة فوق البنفسجية. ومن ناحية أخرى أجري التحليل لمعرفة مكونات الزيت العطري بإستخدام تقنية كروماتوغرافيا الغاز الملحق بالمطياف الكتلي بحيث تمّ تحديد و التعرف على أربعة مركبات في الزيت موضع الدراسة واغلب المركبات عبارة عن كارفاتونستون% 95.58.