Noah Awad Abdellah Salim2022-05-092022-05-092022http://hdl.handle.net/123456789/17174Noah Awad Abdellah SalimAbstract Background Chronic myeloid Leukemia (CML) is a neoplasm characterized by clonal expansion of hematopoietic stem cells , resulting in increase of peripheral blood myeloid ,erytroid, and platelet cells, with bone marrow myeloid hyperplasia a myeloproliferative disease characterized by chromosomal translocation t(9:22) (q34:q11), also known as Philadelphia chromosome. The consequence of this translocation is a bcr-abl oncogenic fusion gene which produces bcr-abl protein with enhanced tyrosine kinase activity. Increased knowledge about CML and the discovery of the molecular pathway of tyrosine kinase has led to the creation of (smart drug) Imatinib myesylate (IM), which competitively binds at ATP binding site and specifically inactivates bcr-abl kinase. In Sudan CML is most common leukemia and represent about 35% of cancer. Objective This study aimed to detect the presence of T315Iand F317l in CML patients treated with Imatinib therapy. We also aimed to assess the strategies for diagnosis, prognosis and treatment in patients treated with Imatinib for T315I and F317l mutations. Materials and Methods A cross sectional study was conducted at Radio and Isotope Center at Khartoum and approved in period from June 2017 to April 2021 at Alneelain University, Facaulty of Medical Laboratory Science. The study population was Sudanese Chronic Myeloid leukemia patients with different age groups whom attended Radio and Isotope Center at Khartoum and approved to participated in this study A total of 100 patients were included in this study matched age and sex. Five (ml) venous blood samples were collected from each subject in EDTA blood container 2.5 ml of blood sample was analyzed by automated hematology analyzer for measurement of complete blood counts and the remaining 2.5ml was used for DNA extraction and screened by Allele Specific Oligonucleotide Polymerase Chain Reaction (ASO-PCR) technique to detect T315I and F317l mutations. Data were analyzed by statistical package for social science (SPSS) computer program version 20. Results This study shows that, 67(67%) were males and 33(33%) were females with ratio 2:1, and average age of (43.89±13.1) years old. Two % of Both mutations T315I and F317L was found in our population, first was a female 45 years old and in accelerating phase and bone marrow result show blast cells 16%, TWBCs count was (65.4x 109/L), Platelet count was (599x 109/L), and Hemoglobin concentration was 7.5 g/dl, second patient was a male 23 years old and he was in chronic phase and bone marrow result show blast cells less than 2.0%, TWBCs count was (33.2 x109/L),Platelet count was (78x 109/L),Hemoglobin concentration was 8.2 g/dl. The mean of patients have both mutations in TWBCs were (49.20 x109/L) and mean of patients not have both mutations in TWBCs were (11.76 x109/L), so that patients whom have both mutations T315I and F317L show increased in the mean of TWBCs (49.20 x109/L) more than the mean of TWBCs in patients whom have not mutations (11.76 x109/L) table (3.2).Also The mean of patients have both mutations in HCT were (7.50) while The mean of patients have not both mutations in HCT were(36.48) ), so that patients whom have both mutations T315I and F317L show decreased in the mean of HCT (7.50) more than the mean of HCT in patients whom have not mutations (36.48) table (3.2).While other parameters as RBCs ,Hb, ,MCH,MCHC,PLTs and MCV were normal in all patient. One patient was found as a single mutation for T315I in a male 45 years old and he was in chronic phase and bone marrow result show blast cells less than 6.0%, TWBCs count was (25.3x109/L), platelet count was (121x 109/L), Hemoglobin concentration was 11 g/dl table (3.3). TWBCs of this patient have a singleT315I mutation was high than the normal The study found significant different (P.value 0.037) between phases and age, also found insignificant difference of sex among phases, T315I mutation and F317L mutation. Also the study found insignificant difference (P.value 0.4) of age among T315I mutation, and age among F317L mutation (P.value 0.4). Conclusion Low frequency of T315I resistant mutation is detected in CML patient treated with Imatinib in Sudan. Low frequency of F317L resistant mutation is detected in CML patient treated with Imatinib in Sudan. TWBCs counts increased with T315I and F317L mutations. HCT decreased with T315I and F317L mutations. مستخلص البحث الخلفيه اللوكيميا النخاعية المزمنة (CML) هي ورم يتميز بالتوسع النسيلي للخلايا الجذعية المكونة للدم ، مما يؤدي إلى زيادة الخلايا النخاعية والصفائح الدموية الطرفية ، مع تضخم نخاع العظم النخاعي وهو مرض تكاثر نقي يتميز بالانتقال الكروموسومي (9:22) (q34: q11) ، المعروف أيضًا باسم كروموسوم فيلادلفيا. نتيجة هذا الانتقال هو جين اندماج مسرطنة bcr-abl ينتج بروتين bcr-abl مع نشاط التيروزين كيناز المعزز. أدت زيادة المعرفة حول CML واكتشاف المسار الجزيئي لتيروزين كيناز إلى إنشاء (عقار ذكي) imatinib myesylate (IM) ، والذي يرتبط بشكل تنافسي في موقع ارتباط ATP ويثبط نشاط bcr-abl kinase على وجه التحديد. يعتبر سرطان الدم النخاعي المزمن في السودان أكثر أنواع اللوكيميا شيوعًا ويمثل حوالي 35٪ من حالات السرطان. الهدف هدفت هذه الدراسه اللي الكشف عن وجود طفرات F317L,T315I فى المرضى بعلاج Imatinib تهدف ايضا الي تقييم ااستراتيجيات التشخيص والعلاج فى هذه الطفرات المقاومه للعلاج. الطريقه هذه دراسة مقطعية أجريت في جامعة النيلين بولاية الخرطوم خلال الفترة من يونيو 2017 إلى ابريل 2021 لمرضى سرطان الدم النخاعي المزمن (CML) الذين تم تشخيصهم إكلينيكيًا ومختبريًا بإيجابية فيلادلفيا والتي عولجت بـ Imatinib. شارك ما مجموعه 100 مريض في هذه الدراسة متطابقة العمر والجنس. تم جمع خمسة مل من عينات الدم الوريدي من كل موضوع في حاوية الدم EDTA ، وتم تحليل 2.5 مل من عينة الدم بواسطة محلل أمراض الدم الآلي لقياس تعداد الدم الكامل ، و 2.5 مل المتبقية المستخدمة لاستخراج الحمض النووي وفحصها باستخدام Allele Specific Oligonucleotide Polymerase Chain Reaction. تقنية (ASO-PCR) للكشف عن طفرات T315I و F317l. تم تحليل البيانات بواسطة الحزمة الإحصائية لبرنامج العلوم الاجتماعية (SPSS) الإصدار 20. النتيجه شملت هذه الدراسة 67 (67٪) من الذكور و 33 (33٪) من الإناث بنسبة 2: 1. تراوحت الأعمار من 10 إلى 70 سنة ، وبلغ متوسط ​​أعمار المرضي 43.89 سنة. تم العثور على كل من الطفرات T315I و F317L في مريضين ، الأول كان أنثى تبلغ من العمر 45 عامًا وفي المرحلة المتسارعة ونتائج نخاع العظم تظهر خلايا الانفجار 16٪ ، وكان عدد TWBCs (65.4x 109 / L) ، وكان عدد الصفائح الدموية (599x 109 /) L) ، وكان تركيز الهيموجلوبين 7.5 جم / ديسيلتر ، وكان المريض الثاني ذكر 23 عامًا وكان في المرحلة المزمنة وكانت نتيجة نخاع العظم تظهر خلايا انفجار أقل من 2.0٪ ، وكان عدد خلايا الدم البيضاء (33.2 × 109 / لتر) ، وعدد الصفائح الدموية كان (78 × 109 / لتر) ، وكان تركيز الهيموجلوبين 8.2 جم / ديسيلتر. كان متوسط ​​المرضى الذين لديهم طفرات في TWBCs (49.20 x109 / L) ومتوسط ​​المرضى الذين ليس لديهم طفرات في TWBCs كان (11.76 x109 / L) ، بحيث أظهر المرضى الذين لديهم طفرات T315I و F317L زيادة في متوسط TWBCs (49.20 x109 / L) أكثر من متوسط ​​TWBCs في المرضى الذين ليس لديهم طفرات (11.76 x109 / L) جدول (3.2) كما كان متوسط ​​المرضى الذين لديهم طفرات في HCT (7.50) بينما كان متوسط ​​المرضى لديهم لم تكن كلتا الطفرات في كليات التقنية العليا (36.48)) ، لذا فإن المرضى الذين لديهم طفرات T315I و F317L يظهرون انخفاضًا في متوسط ​​HCT (7.50) أكثر من متوسط ​​HCT في المرضى الذين ليس لديهم طفرات (36.48) جدول (3.2) بينما كانت المعلمات الأخرى مثل كرات الدم الحمراء ، والهيموغلوبين ، و MCH ، و MCHC ، و PLTs ، و MCV طبيعية في جميع المرضى. تم العثور على مريض واحد كطفرة مفردة لـ T315I في ذكر يبلغ من العمر 45 عامًا وكان في مرحلة مزمنة وأظهرت نتيجة نخاع العظم أن الخلايا المتفجرة أقل من 6.0٪ ، وكان عدد كرات الدم البيضاء TWBCs (25.3 × 109 / لتر) ، وكان عدد الصفائح الدموية (121 × 109) / لتر) ، تركيز الهيموجلوبين كان 11 جم / ديسيلتر جدول (3.3). TWBCs لهذا المريض لديها طفرة واحدة T315I كانت عالية من المعدل الطبيعيLeukemia PatientsChronic MyeloidThesis