Phytochemical, Chromatographic Analysis and Biological Investigations of Bee Honey Extracts

Abstract

Abstract The present study was carried out to extract the crude Bee honey successively with different solvents, methanol, aqueous and ethylacetate extracts are used to investigate the secondary metabolites using phytochemical screening indicated the presence of deoxy sugars, reducing sugars, flavonoids, leucoanthocyanins, carbohydrates, tannins, triterpenes and saponins. The quantitative determination of sugars confirmed that fructose has high percentage 86%. The quantitative determination of chemical constituency showed that flavonoids gave the highest percent of extractability (60%), saponins (30%), The sample of bee honey extracted using chloroform and ethyl acetate solvents in addition to crude honey are investigated in vitro to assess the antimicrobial activity against four Bactrial strains namely Staphylococcus aureus,Bacillus subtilis (gram +ve Bactria) and Escherichia coli,Pseudomonas aeruginosa(gram –ve Bactria) and one fungi (Candida albicans). Crude honey exhibited highest antimicrobial activity (inhibition zone: 15mm, at 100% concentration) against Escherichia coli and Bacillus subtilis followed by chloroform extract. The same extracts mentioned above were investigated to assess their antioxidant activity, the chloroform extract shows the highest antioxidant activity 76% then crude honey 75% and finally ethyl acetate extract 71%. The active honey cholorform extract was further investigated by analytical and preparative TLC chromatographic techniques, afforded four pure fractions which were analyzed by Ultraviolet and infra-red spectroscopy.

المستخلص تناولت هذه الدراسة إستخلاص المكونات الكيميائية لخام عسل النحل بإستخدام مذيبات مختلفة . تم إجراء المسح الكيميائى الأولى لثلاث مستخلصات لعسل النحل هى الميثانول، الماء وخلات الإيثل الذي كشف عن وجود السكريات منقوصة الأوكسجين، السكريات المختزلة، الفلافونويدات، الأنثوسيانينات، الكاربوهيدرات، الكومارينات، اللألكلويدات، التانينات، التربينات الثلاثية والصابونينات. كما تم تحديد نسبة السكريات المختزلة كميا حيث شكل الفركتوز النسبة الأعلى 86%. تم أيضا التقدير الكمى لبعض المكونات الكيميائية حيث وجد أن الفلافونيدات تشكل النسبة الأعلى (60%) تليها الصابونينات (30%). من ثم أُجريت التجارب الحيوية المعملية لكل مستخلص بالإضافة لخام العسل لإختبار فعاليتها ضد أربعة أنواع من البكتريا المعيارية ، وهي نوعان من البكتريا موجبة الجرام (العصوية الرقيقة والعنقودية الذهبية) ونوعان من البكتريا سالبة الجرام (الشريكية القولونية والزائفة الزنجارية) وفطر المبيضية البيضاء. أظهر خام العسل أعلى فعالية مثبطة لنمو الميكروبات قيد الدراسة ) مساحة التثبيط تساوي 15مليمتر عند تركيز 100% (ضد الإشريكية القولونية والعنقودية الذهبية يليه مستخلص الكلوروفورم. أجريت أيضا التجارب المعملية لنفس المستخلصات سابقة الذكر لإختبار فعاليتها كمضادات للأكسدة حيث أظهر مستخلص الكلوروفوم أعلى نسبة 76% يليه خام العسل 75% ثم مستخلص خلات الإيثيل 71%. عليه أخضع مستخلص الكلوروفورم بناءً على فعاليته العالية للطرق التحليلية مثل كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة التحليلية والتحضيرية التى نتج عنهما فصل أربعة مجزئات نقية تم تحليلها بإستخدام طيف الأشعة فوق البنفسجية الأشعة تحت الحمراء